康婷集团第三季《探索科学，乐享健康》第三期——CAR-T细胞治疗血液型淋巴瘤

　　科普栏目之

　　CAR-T细胞治疗血液型淋巴瘤

　　二十世纪以来，地球的环境污染日趋加剧，人类生活环境不断恶化，各种致癌因素与人类的接触越来越日常和频繁，导致恶性肿瘤的发病率也逐年递增，近年已经超过心脑血管疾病，成为人类健康的最大敌人。据公开资料显示，全球每年有1400多万新发肿瘤病例，预计2030年这一数字将增加到2100多万。目前，每年有880万人死于肿瘤，全球肿瘤死亡人数占总死亡人数的近六分之一，并且在许多低收入和中等收入国家，肿瘤病例确诊时间过晚，导致患者治愈的机率较小，希望渺茫。

　　肿瘤“逃逸”

　　肿瘤是致癌因素导致机体某些细胞丧失正常生长调控能力而引发克隆性异常增殖的病变，很多临床数据表明，肿瘤的发生与机体免疫功能存在密切的相关性，宿主免疫功能低下或受抑制往往都会导致肿瘤发生率的增高。正常情况下，机体的免疫系统能够识别、监视并最终“清除”绝大多数的恶变细胞，但可能会有少数恶变细胞躲过清除而进入“平衡期”。在此期间，免疫系统和恶变细胞相互塑造，但机体并不表现出临床症状，平衡期在极端情况下甚至可涵盖机体整个生命过程，但是恶变肿瘤细胞的主动作用一旦打破这种平衡状态，肿瘤细胞将实现成功“逃逸”导致免疫系统丧失对肿瘤细胞生长的控制。

　　肿瘤的治疗方式

　　根据肿瘤的形态特征可将其分为血液型肿瘤和实体瘤。针对不同的肿瘤，目前可采取的治疗方式有：放化疗、手术切除、靶向药物治疗以及现在研究比较火热的免疫疗法。每一个治疗方式都有优缺点，放化疗是一种“杀敌一千，自损八百”的治疗方式，针对局部肿瘤可起到减轻肿瘤负荷，减瘤见效快的效果，但是对于正常细胞组织也有一定的杀伤作用，并且患者经过放化疗后耐受性显著性变差；手术切除，可局部快速切除肿瘤组织，并且治疗过程简单，但是对于微小、血液型肿瘤以及转移的病灶无效，而且肿瘤患者生存率较低；靶向药物治疗，其治疗具有选择性，针对不同的适应症都有一定的疗效，并且毒副作用小，但是其也存在着治疗成本高，多次治疗后患者体内产生耐药性的致命缺陷。

　　免疫疗法，通俗来讲免疫疗法就是利用患者自身的免疫系统来治疗疾病。我们日常生活中接种的疫苗，就是一种特异性免疫疗法，起到预防疾病发生的作用。另外一种免疫疗法是非特异性免疫疗法，其主要是通过活化患者体内的免疫细胞，综合提升患者固有的免疫力，从而封锁肿瘤细胞并将肿瘤杀灭，如向患者体内输入活化后的NK、CIK细胞，以及现在国内外研究比较火热的CAR-T、CAR-NK、TCR-T治疗方式。目前，这些技术都取得了长足的进步，在治疗血液型肿瘤方面取得了不错的成效。俨然免疫疗法已成为了当今治疗肿瘤的一大杀伤性武器。

　　CAR-T治疗血液型肿瘤

　　康婷集团的科研人员经过反复的实验，不仅成功建立出了血液型肿瘤动物模型，而且还构建出了用于杀伤血液型肿瘤的CAR基因序列。建成的血液型肿瘤动物模型，通过检测可以发现其淋巴结节肿大，并且动物随着肿瘤细胞在体内的不断扩散，其部分脏器发生严重病变。（Fig1）

　　Fig1.血液型肿瘤动物肾脏发生病变

　　成功构建的CAR基因，转染至T淋巴细胞后，用于体外杀伤肿瘤细胞，通过检测肿瘤细胞的荧光强度来检验CAR-T细胞杀伤肿瘤细胞的效果。通过检测CAR-T细胞杀伤肿瘤细胞24h和48h的效果，可以看出我们构建的CAR-T细胞，在杀伤血液型肿瘤细胞方面具有显著成效（Fig2、Fig3）。

　　Fig2.CAR-T细胞杀伤肿瘤细胞24h效果

　　Fig3.CAR-T细胞杀伤肿瘤细胞48h效果

　　荧光强度代表肿瘤细胞数量，在CAR-T实验组中，经48h的杀伤后，荧光已基本消失，肿瘤细胞被大量消灭。

　　体外实验验证了CAR-T杀伤肿瘤细胞的效果后，我们将CAR-T细胞移植到血液型肿瘤动物体内，来进一步验证CAR-T细胞在动物体内杀伤肿瘤的效果。在模型动物移植肿瘤细胞初期，我们就将CAR-T细胞分三个疗程移植到受试动物体内，并检测其体内荧光信号强度（肿瘤细胞可发出荧光信号），来检验CAR-T细胞的杀伤效果。血液型淋巴瘤动物经过三个疗程的治疗后，CAR-T治疗组模式动物体内荧光信号较弱，而其它组模式动物体内的肿瘤细胞已扩散至全身，并且停止治疗后1周，除CAR-T治疗组外，其它组模式动物均已死亡。（Fig4、Fig5、Fig6、Fig7）由此看出CAR-T细胞在治疗血液型淋巴瘤方面具有显著的效果，CAR-T细胞治疗后的模式动物寿命显著性长于其它治疗组。

　　Fig4.CAR-T治疗模式动物第一个疗程

　　Fig5.CAR-T治疗模式动物第二个疗程

　　Fig6.CAR-T治疗模式动物第三个疗程

　　Fig7.模式动物经过三个疗程治疗后1周

　　此外，我们在解剖血液型淋巴瘤受试动物时，发现其肾脏病变较为严重。我们对各个治疗组模式动物的肾脏进行了病理学分析，病理学分析结果显示，除了CAR-T治疗组模式动物的肾脏具备完善的肾脏结构（肾小体结构清晰可见）外，其它治疗组模式动物的肾脏完全发生病变，肾小体结构彻底消失。（Fig8）

　　Fig8.模式动物肾脏H.E.染色病理分析

　　CAR-T细胞疗法治疗血液型淋巴瘤的有效性在体外和体内实验中均得到了证实，但是这仅仅是对一种类型的血液型淋巴瘤治疗的研究工作，而血液型淋巴瘤的发病类型就有多种。此外，CAR-T细胞在实体瘤的治疗方面依然是世界性难题。如何构建出一种杀伤多种类型血液型肿瘤的CAR-T细胞，构建出一种对实体瘤也同样有杀伤效果的CAR-T细胞是我们科研人员现阶段努力的方向。与此同时，在构建CAR-T细胞的过程中，如何避免因子风暴对患者带来的二次伤害也成为另一项严峻的课题。

　　科学的探索永无止境，康婷人对人类健康事业的追求亦永无止境。在人类攻克癌症这一顽疾的崎岖道路上，有康婷人洒下的滴滴汗水和一步步坚实的脚印为证，我们终将取得最终的胜利！

　　参考文献

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